Ácido fólico em alimentos * coluna de imunoafilidade IAC-SEP

Ácido fólico em alimentos * coluna de imunoafilidade IAC-SEP

IAC-SEP®* Coluna de afinidade imunológica

(Número do produto: IAC322)

Usar o objeto

IAC-SEP®* Coluna de AfinidadeEspecificação em amostras purificadas*，Ele usa o gel de againe em forma de coluna como um veículo de fase sólida, o gel de againe é acoplado ao anticorpo * para formar um imunosorbente e a coluna é feita de coluna de imunoafilidade. Ele é capaz de especificidade em amostras purificadas *. Amplamente utilizado na extração de amostras de bebidas, leite e grãos, o método é rápido, fácil de operar e precisa, desempenhando um papel importante na melhoria da qualidade e segurança dos alimentos.

Princípios

*A coluna de imunoafilidade pode ser específica em amostras purificadas*，A amostra é misturada, extraída, filtrada e, em seguida, filtrada através da coluna de imunoafilidade. Neste momento, *substânciasLigado a anticorpos na coluna de afinidade. Remova as impurezas da coluna de imunoafilidade com água destilada. Separe * dos anticorpos através da coluna de separação com desidratação. Depois, a desinfecção é injetada em HPLC ou LC-MS para medição.

Condições de armazenamento

A coluna de afinidade é mantida a 2-8 ° C, não pode congelar e tem uma vida útil de 18 meses. Recomendado para uso a temperatura ambiente (18-30°C)- É.

Preparação de soluções experimentais

pH 7,4 PBSSolução：8.0 g de NaCl + 2,90 g de Na2HPO4 12H2O + 0,24 g de KH2PO4 + 0,2 g de KCl + 990mL de água pura dissolvida, adicionando água pura para 1 litro.

10%Ascorbato de sódio：Pese 10g de L-ascorbato de sódio em garrafa de capacidade de 100ml, adicione água para dissolver e misturar.

Liquido de lavagem (30% acetonitril + 0,2% 3)Ácido fluoroacetico): medir exatamente 30mL de acetonitril para adicionar a garrafa de capacidade de 100mL, em seguida, adicionar 0,2mL trêsÁcido fluoroaceticoDepois, condense com água pura até 100 ml.

Outros reagentes necessários:(Sigma P1750)

Condições de cromatografia líquida

Coluna cromatográfica: Agilent-C18, 4,6 x 150mm (5um)

Fase de fluxo:0,1% 3Ácido fluoroaceticoAcenitrilo = 85:15 (v/v)

Velocidade: 0,5 ml/min

Detector: Detector UV, 280nm

Volume de amostragem: 50uL

Passos de análise

1）Extração e diluição de amostras：

Etapas de operação de amostras de alimentos para bebês, alimentos prontos para bebês, leite, leite em pó, grãos, barras energéticas e outros:Denominação1-10gA amostra (a quantidade de peso é determinada de acordo com a faixa de teste necessária) é colocada em250 mlgarrafas conicasSerá.50em mL pH 7,4 PBSSoluçãoAdicionargarrafa conicameio, misturado. Inscrever4g* Abate a cama durante 10 minutos.Inscrever6 ml 10%Ascorbato de sódio, agitar a cama por 5 minutos.Coloque a garrafa conica no banho de água a 37 ° C e agite a cama por 2 h. Em seguida, coloque a garrafa conica no banho de água a 100 ° C por 20 min. Retire a garrafa conica para resfriar a temperatura ambiente; UsarpH 7,4 PBSSoluçãoAcomodação para100 mlShake bem. O líquido será extraído4000 RPMCentrificação 10 min. Remoção precisa para aspirar 10 mL de líquido superior,Reserva- É.

2）Limpeza da amostra

* A capacidade da coluna de imunoafilidade (adsorção*) é450ngQuando a amostra * excede a faixa de medição, reduza adequadamente o volume da coluna superior para que ela esteja dentro da faixa de detecção e calcule o conteúdo preciso.

Ácido fólico em alimentos * coluna de imunoafilidade IAC-SEP