NEB M0202S T4 Conectase de DNA 20000U

característica

■ Conexão eficiente de extremos viscosos e extremos
Clonagem T/A
Reparação de corte de dsDNA
• Construir uma biblioteca de clonagem de alta abundância
Conexão de RNA e DNA

NEB M0202S T4 Conectase de DNA 20000U

Visão geral

Esta enzima cataliza os extremos 5'-fosfato e 3'-hidroxi vizinhos no DNA ou RNA de dupla cadeia para formar ligações fosfato-diéster. Essa enzima não é apenas capaz de catalisar conexões entre terminais planas ou viscosas, mas também repara cortes de cadeia única em DNA de dupla cadeia, RNA ou DNA/RNA híbrido.

origem

Purificação deE. coliC600 pcl857 pPLc28 lig8.

Condições de Reação

1X T4 DNA conectase tampão de reação
[50 mM Tris-HCl (pH 7,5 @ 25 ℃), 10 mM MgCl2, 10 mM DTT, 1 mM ATP]. * Concentração final de DNA 5′ de 0,1-1,0 μM, 16 ° C.
Inativação térmica: 65 ° C por 10 minutos.

Definição de unidade (unidade ativa terminal viscosa)

1 unidade refere-se à quantidade de enzima necessária para conectar 50% do fragmento de DNA λ digerido por HindIII [concentração 5' terminal de 0,12 μM (300 μg/ml)] em 20 μl de tampão de reação de conectase de DNA T4 1X em 16 ° C durante 30 minutos.

Concentração

400.000 unidades/ml e 2.000.000 unidades/ml.

Precauções

comE. coliDiferentemente da conectase de DNA que requer NAD+ como co-fator, o co-fator da conectase de DNA T4 é ATP.

A conectase de DNA T4 diluída deve ser mantida em um tampão de armazenamento de glicerina de 50% (tampão diluído A, NEB #B8001). Se usado imediatamente após a diluição, também pode ser diluído com tampão de reação de conectase de DNA 1X T4.

Apenas com a adição de 1 mM de ATP ao sistema de reação, a reação de ligação pode ser realizada em quatro tampões de endocesa restritiva fornecidos pelo NEB ou em

T4 DNA polinucleótido kinase reação é realizada em tampão.

Conectase de DNA T4

Número da mercadoria

Especificações

Preço

Pequim estoque

Xangai estoque

# M0202L

100.000 unidades

ter

ter

# M0202M

(concentração alta 5X) 100.000 unidades

ter

ter

#M0202S

20.000 unidades

ter

ter

# M0202T

(concentração alta 5X) 20.000 unidades

ter

ter

# M0202V

10.000 unidades

ter

ter