HYPERCARB Coluna de cromatografia líquida

Introdução à coluna de cromatografia líquida HYPERCARB

O grafito perforado poroso (P) é uma estrutura de fase fixa em que os átomos de carbono se ligam estreitamente em uma estrutura hexagonal plana para formar compostos aromáticos policíclicos de macromoléculas. O Hypercarb é diferente da ligação de silicone tradicional em termos de retenção estrutural e é estável em qualquer condição de pH, permitindo a retenção e separação ideais de substâncias altamente polares. A coluna de cromatografia líquida HYPERCARB é ideal para resolver problemas de separação de cromatografia líquida de alta eficiência em fase inversa, fase positiva e espécies de reacção LC/MS. A retenção na coluna de Hypercarb é o resultado da adsorção com a indução de carga de substâncias polares na superfície de polarização do grafito, * a coluna de cromatografia de Hypercarb reforça a retenção dos compostos polares, de acordo com a separação estrutural do analítico, com desempenho extremamente estável em ambientes de pH extremos e altas temperaturas.

HPLC de alta temperatura com Hypercarb
Características do Carbono Gráfico Poroso (Porous Graphitic Carbon)
• Mecanismo de retenção: forma e polaridade do analítico alvo
• Desenvolver HPLC de alta temperatura para melhorar a velocidade de análise e a separação
• LC “Verde”
Adequado para análise de compostos polares
Estabilidade do pH: 0-14
• Seletividade estéreo
• Fornecer outra coluna cromatográfica seletiva

Nós listamos aqui apenas algumas das colunas de análise de especificações mais usadas, se você precisar de mais informações sobre o produto, entre em contato com nosso pessoal de vendas.

- 100% de grafito de carbono poroso melhora a capacidade de separação
Ø Retenção ideal de analíticos polares fortes
Separação de compostos de estrutura semelhante
O pH permanece estável de 0 a 14.
Ideal para aplicações a altas temperaturas
O grafito de carbono poroso (PGC) é uma fase fixa em que os átomos de carbono se ligam estreitamente em uma estrutura hexagonal plana, semelhante a uma macromolécula de hidrocarbonetos aromáticos policíclicos. O Hypercarb difere das ligações de silicone tradicionais em termos de estrutura e propriedades de retenção e permanece estável a todos os valores de pH. Pode ser usado para retenção e separação de compostos altamente polares. A coluna Hypercarb é ideal para resolver problemas de separação em aplicações de HPLC em fase inversa, HPLC em fase positiva e HPLC/MS (LC/MS).
Reserva e separação

O mecanismo de separação de Hypercarb depende principalmente da polaridade e da forma do analítico alvo. Este mecanismo de retenção especial permite manter e separar com sucesso certos compostos que não podem ser separados com cromatografia líquida de alta eficiência de fase inversa típica. A análise de substâncias polares com o Hypercarb evita o uso de soluções de tampão complexas e reagentes para pares iónicos e, de acordo, melhora a força de lavagem de fase orgânica, tornando o sistema mais compatível com vários detectores, como MS.

A retenção da coluna de cromatografia líquida original Hypercarb é o resultado da combinação de dois mecanismos:

Adsorção: O efeito de adsorção do Hypercarb ao analítico depende em grande parte da área de contato com as moléculas de grafito de carbono, bem como do tipo e da localização do grupo funcional com a superfície de contato. A intensidade da interação depende do tamanho e da direção da área da superfície de contato molecular com o grafito. No espaço tridimensional, quanto mais a estrutura se aproxima do plano, maior a retenção das moléculas.

Segundo mecanismo: efeito indutor de compostos polares e superfícies de polarização de grafite. O efeito dipolar induzido pela carga elétrica faz com que a matéria polar tenha uma forte retenção. Quando a substância polar se aproxima da superfície do grafite, o efeito dipolar induzido é gerado, reforçando a atração mútua da amostra e da superfície do grafite. Essas cargas não são interferidas pelas cargas da ionização molecular, como os íons de compostos alcalinos produzidos em condições ácidas. O mecanismo dipolar induzido pela polaridade é atribuído à interação da superfície do grafite com a carga polarizada molecular. Devido à intensa interação do Hypercarb, colunas cromatográficas mais curtas podem ser usadas durante o desenvolvimento do método. Na maioria dos casos, 100 mm ou menos é suficiente para a separação.

Aumento da retenção de analíticos polares de coluna de cromatografia líquida original Hypercarb

Na cromatografia de fase inversa típica, a retenção do analítico está diretamente relacionada com sua hidrofobia: quanto mais hidrofobia for, maior o tempo de retenção do analítico; Ao contrário, à medida que a polaridade do analítico aumenta, a interação analítico-solvente começa a prevalecer e a retenção diminui. Essa regra é correta para a maioria dos sistemas inversos. Hypercarb é uma exceção à regra e, em algum momento, a retenção também aumenta à medida que a polaridade do analítico aumenta. Este fenômeno é chamado de “efeito de retenção polar no grafite” (PREG). Esta propriedade torna a coluna Hypercarb particularmente útil para a separação de compostos altamente polares (logP abaixo de 4), que geralmente são difíceis de retener e separar em ligações alquilo e fase fixa de silicone. Compostos altamente polarizados podem ser mantidos e separados em colunas Hypercarb sem o uso de reagentes para pares iónicos ou fases de fluxo complexas.

Estabilidade de pH de largura da coluna de cromatografia líquida original Hypercarb

Outra grande vantagem da coluna Hypercarb é a estabilidade em qualquer ambiente químico e físico. Devido a esta propriedade, ele pode ser mantido estável na faixa de pH 0-14 e pode ser analisado a valores de pH que não podem ser usados ​​por ligações e colunas de silicone clássicas. Em condições de alta temperatura e alta pressão, as colunas Hypercarb podem ser aplicadas a várias fases de fluxo de sal tampão.

Compostos semelhantes à estrutura de separação da coluna de cromatografia líquida original Hypercarb

Devido ao efeito da retenção da superfície de fase fixa e da forma do analítico, a coluna Hypercarb é capaz de separar analíticos de estrutura semelhante, como isômeros e congêneros. As colunas C18 tradicionais são difíceis de separar grupos sub-metilo e metilo, enquanto que as colunas Hypercarb permitem uma boa separação. Os isômeros antibióticos Axetil, devido à sua semelhança estrutural, separam sua estrutura espacial da propriedade da superfície do grafito. A coluna Hypercarb não só teve uma grande melhoria na separação do que a coluna de silicone, mas também mudou na sequência de lavagem.

A coluna de cromatografia líquida original Hypercarb é ideal para a separação de compostos polares
A análise de compostos altamente polares é um grande desafio para RPLC/MS, porque esses compostos não podem ser bem separados em fases fixas hidrofóbicas tradicionais. A Hypercarb superou esses desafios porque:
Ø uso de "MS compatível" fase de fluxo, Por exemplo, 0,1% de ácido fórico ou acetato e tampões voláteis de baixa concentração (como acetato de amônio ou ácido amônico) para retenção e separação de compostos altamente polarizados
Ø Pode ser usado em fase de fluxo que contém altas concentrações de solventes orgânicos, por isso é mais fácil de atomizar durante a ionização por pressão atmosférica, aumentando a sensibilidade da análise.
Ø A capacidade de pico não diminui quando as colunas cromatográficas são usadas com diâmetros mais curtos e menores, e a velocidade de fluxo mais baixa é mais compatível com a tecnologia MS quando os orificios estreitos e as colunas capilares são usados
Ø É extremamente estável em qualquer fase de fluxo e não produz perda de fase fixa, porque a superfície de grafite porosa Hypercarb não possui ligações e fases.