Análise de questões frequentes em aplicações de cromatografia líquida

O cromatográfico de fase líquida consiste principalmente em garrafas de armazenamento, bombas, amostradores, colunas, caixas de temperatura de colunas, detectores e sistemas de processamento de dados. Para todo o sistema, colunas, bombas e detectores são essenciais.

O cromatográfico líquido, como um instrumento de alta precisão, pode causar problemas se não for operado corretamente durante o uso. Os mais comuns são os problemas de pressão de coluna, problemas de deriva e anomalias de pico.
Problemas de pressão da coluna: o problema da pressão da coluna é o lugar onde a atenção precisa ser prestada durante o uso de cromatografia líquida, a estabilidade da pressão da coluna está estreitamente relacionada com a boa ou má forma do pico cromatográfico, o efeito da coluna, o efeito de separação e o tempo de retenção. A chamada estabilidade da pressão da coluna não significa que o valor da pressão esteja estável em um valor constante, mas sim que a variação da pressão esteja entre 50 PSI (3,3 Bar) (uma mudança lenta e suave da pressão da coluna é permitida quando se usa lavagem de gradiente). A pressão elevada e baixa são problemas de pressão.
Pressão excessiva: este é um problema comum no uso do cromatográfico líquido, o que se refere a um aumento súbito da pressão, geralmente devido a obstruções no fluxo. Neste momento, devemos verificar em partes.
(1). Primeiro, desconecte a entrada da bomba de vácuo, neste momento o tubo PEEK está cheio de líquido, deixando o tubo PEEK abaixo da garrafa de solvente, ver se o líquido cai livremente, se o líquido não gota ou gota lentamente, a cabeça do filtro do solvente está bloqueada. Tratamento: Mergulhe com ácido nítrico de 30% por meia hora e enxague com água ultra-pura. Se o líquido cair livremente, a cabeça do filtro do solvente é normal durante a inspeção;
(2). Abra a válvula de purga para que a fase de fluxo não passe pela coluna e, se a pressão não cair significativamente, a cabeça branca do filtro está bloqueada. Tratamento: remover a cabeça branca do filtro e ultrassom com 10% de isopropanol por meia hora. Se a pressão cair abaixo de 100PSI (6.7Bar), a cabeça branca do filtro é normal, durante a inspeção;
(3). Retire a extremidade da saída da coluna cromatográfica, se a pressão não cair, a coluna está bloqueada. Tratamento: se o sal tampão está bloqueado, use 95% de água para a pressão normal. Se alguma substância com forte retenção causar obstrução, é necessário compensar a pressão normal com um fluxo mais forte do que a fase de fluxo atual. Se a pressão de lavagem não cair por um longo tempo de acordo com o método acima, pode considerar a entrada e saída da coluna por sua vez ligada ao instrumento e lavar a coluna com a fase de fluxo. Neste momento, se a pressão da coluna ainda não cai, apenas a placa de filtragem de entrada da coluna é trocada, mas uma vez que a operação não é boa, é fácil causar a queda do efeito da coluna, então tente usar o mínimo possível.
Pressão baixa demais: o fenômeno de pressão baixa demais é geralmente devido ao vazamento do sistema, o método de tratamento: procure várias interfaces, especialmente a interface das duas extremidades da coluna cromatográfica, gire o vazamento. Claro que há uma outra razão é que a bomba entra no ar, mas neste momento o desempenho é muitas vezes a pressão instável, alto e baixo, um pouco mais grave fará com que a bomba não consiga aspirar o líquido. Método de tratamento: Abra a válvula de purga, com uma velocidade de fluxo de 3 ~ 5ml / min, se não for possível, use a agulha na válvula de esvaziamento para empréstimo de força externa para aspirar a bolha.