O sistema de expressão eunucléar de células mamíferas é uma proteína exótica produzida pelas células de mamíferos após a tradução e o reprocessamento, muito melhor na atividade do que o sistema de expressão protonuclear e o sistema de expressão eunucléar, como leveduras e células de insetos, mais próximo das proteínas naturais. Os sistemas de expressão celular de mamíferos podem fornecer modificações pós-tradução de proteínas recombinantes humanas mais próximas do estado natural. Durante a expressão das proteínas, a dobragem e a polimerização das proteínas que se aproximam das proteínas naturais são formadas, com a estrutura espacial e as modificações necessárias para a proteína ativa.
As proteínas exóticas produzidas pelas células de mamíferos após tradução e reprocessamento são muito melhores do que os sistemas de expressão protonuclear e eunucléar, como as células de levedura e insetos, e mais próximas das proteínas naturais. Essa propriedade permite que os sistemas de expressão celular de mamíferos sejam amplamente utilizados em medicamentos recombinantes, especialmente no desenvolvimento e produção de anticorpos monoclonais recombinantes terapêuticos.
A vantagem do sistema de expressão celular de mamíferos é que ele pode orientar o dobramento correto das proteínas, fornecendo funções de pós-processamento de tradução como N-gliciliação complexa e O-gliciliação precisa. Assim, os produtos de expressão estão mais próximos das moléculas de bioproteínas superiores naturais em termos de estrutura molecular, propriedades físico-químicas e funções biológicas. Nos 30 anos desde que o DNA nu foi transfectado diretamente às células de mamíferos, os sistemas de expressão celular de mamíferos não só se tornaram plataformas para a produção de vários medicamentos de engenharia genética, mas também desempenharam um papel extremamente importante na descoberta de novos genes e no estudo da estrutura e função das proteínas.
Dependendo da via de entrada na célula hospedeira, os veículos de expressão podem ser divididos em veículos virales e veículos plasmódicos. Os veículos virales são na forma de partículas virales que, através da interação da proteína da envelope viral com a membrana celular hospedeira, os genes estrangeiros entram na célula. Os portadores de vírus comumente utilizados são adenovírus, vírus associados à adenose, retrovírus, etc.
Os elementos essenciais dos veículos de expressão celular de mamíferos incluem promotores de alta atividade, sequências de terminação da transcrição e sinalização de tradução genética eficaz. É necessário adicionar genes marcadores, cópias de sequências de ponto de partida e ribosomas internos no local de entrada.
Várias linhagens celulares comuns que expressam proteínas recombinantes incluem células CHO, células de mieloma, células COS e células 293. De acordo com as diferenças espaciotemporais na expressão da proteína alvo, o sistema de expressão pode ser dividido em um sistema de expressão instantânea, um sistema de expressão estável e um sistema de expressão induzida. O sistema de expressão instantânea refere-se à importação do veículo de expressão após a célula hospedeira não é seletivamente cultivada, o DNA do veículo é perdido gradualmente com a divisão celular, o limite de tempo de expressão da proteína objetivo é curto; As vantagens do sistema de expressão instantânea são a simplicidade e o curto período experimental.