As células-tronco hematopoiéticas (CSH) são capazes de diferenciar todas as células que formam o sistema sanguíneo e são necessárias para manter o sistema sanguíneo. As células-tronco hematopoiéticas são uma célula-tronco pluripotente que tem a capacidade de se auto-renovar e é capaz de gerar células intermediárias de vários sistemas de células sanguíneas através de processos hierárquicos para regenerar as células sanguíneas do organismo.
Para estudar nichos de células tronco, os pesquisadores devem ser capazes de determinar a capacidade de populações celulares para gerar sistemas celulares adultos em condições controladas. A estratégia típica utilizada no experimento foi o transplante de medula óssea rica em HSC para o sistema sanguíneo do rato receptor, que foi eliminado artificialmente após exposição a doses subletais de irradiação. Nestes ratos, as células sanguíneas adultas, bem como as células-tronco e as células precursoras morreram após duas semanas de exposição. As células transplantadas podem diferenciar o novo sistema sanguíneo e, assim, salvar os ratos.

O HSC pode ser re-dividido com base em sua capacidade de reconstrução a curto prazo (ST-HSC), * (LT-HSC) e médio prazo (IT-HSC) [1, 2]. Na maioria dos relatórios, os pesquisadores identificaram o LT-HSC de forma a medir sua capacidade de gerar mononucleos, grípulos e linfocitos circulantes em diferentes momentos de 16 a 44 semanas após o transplante. A análise subcompetitiva das células após o transplante deve ser concluída entre 4 e 6 semanas após o transplante. Em estudos de transplante, ratos C57/BL6 de tipo selvagem são geralmente usados, mas desde que eles carreguem o alelo marcador de glóbulos brancos Ptprcb (CD45.2/Ly5.2). O Instituto Sloan Kettering criou uma linhagem homogênica de ratos conhecida como C57BL/6-Ly5.1 através de um cruzamento de ratos SJL com ratos de tipo selvagem C57/BL6. Estes ratos carregam o alelo marcador de glóbulos brancos Ptprcb (CD45.1/Ly5.1). Usando anticorpos anti-CD45.1 e CD45.2 comumente usados, os pesquisadores podem facilmente identificar as células hospedeiras e transplantadas e determinar o papel que o HSC desempenha em experimentos competitivos. Neste artigo, descrevemos de forma generalizada um experimento simples em que a quantidade de Cd45.2-doadores e CD45.1-hospedeiros no sangue periférico foi determinada em ratos irradiados após um transplante.

(Autor: John F. Woolley, PhD 1, 2 Leonardo Salmena, PhD 1, 2)
Unidades pertencentes: 1. Canadá • Toronto • Universidade de Toronto • Departamento de Farmacologia e Toxicologia 2. Canadá • Toronto • Rede de Saúde Universitária • Centro de Câncer Princesa Margaret)